升級(jí)款細(xì)胞電轉(zhuǎn)儀LE+

產(chǎn)品基本信息：

品牌：Celetrix

型號(hào)：LE+

貨號(hào)：11-0105

特點(diǎn)：

1. 1.界面簡(jiǎn)潔、操作簡(jiǎn)單，

2. 2.可適配20ul、100ul、200ul電擊管;

3. 3.新增細(xì)胞系模式和PBMC模式，使用更便捷；保留傳統(tǒng)模式（Legacy mode），用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)自行設(shè)定電轉(zhuǎn)參數(shù)，得到優(yōu)化的轉(zhuǎn)染效果；

4. 4.新模式優(yōu)化大質(zhì)粒電轉(zhuǎn)的細(xì)胞存活率和轉(zhuǎn)染效率；

5. 5.全新密封加壓型電擊管設(shè)計(jì)：均勻電場(chǎng)從管蓋到管底。可承受電轉(zhuǎn)產(chǎn)生氣體之壓力，在電轉(zhuǎn)瞬間壓縮氣泡，保證電場(chǎng)均勻;                  

6. 6.適用于原代細(xì)胞，包括T,B細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等。原代細(xì)胞質(zhì)粒電轉(zhuǎn)化率為50-80%，mRNA或者Cas9蛋白做基因編輯電轉(zhuǎn)效率可達(dá)90%以上;

7. 7.電脈沖參數(shù)設(shè)定方便，內(nèi)部電路反應(yīng)迅速，設(shè)定完成即可啟動(dòng)，瞬間完成電轉(zhuǎn)。

Celetrix獨(dú)特模式，簡(jiǎn)化電轉(zhuǎn)參數(shù)

Celetrix獨(dú)特地把細(xì)胞電轉(zhuǎn)分為兩個(gè)模式：細(xì)胞系模式和PBMC模式。絕大多數(shù)細(xì)胞系，貼壁生長(zhǎng)的原代細(xì)胞，以及血液干細(xì)胞、刺激生長(zhǎng)的T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞等直徑較大，這類(lèi)細(xì)胞電轉(zhuǎn)參數(shù)較為接近，在細(xì)胞系模式下微調(diào)電壓就可以電轉(zhuǎn)。PBMC（外周血單個(gè)核細(xì)胞）以及未刺激的T細(xì)胞、B細(xì)胞和NK細(xì)胞等直徑較小需要電壓較高，在PBMC模式下進(jìn)行電壓微調(diào)即可。兩種模式下電轉(zhuǎn)液是通用的，用戶使用非常方便。

--------------------------------------------------------------關(guān)于Celetrix電轉(zhuǎn)儀系列-----------------------------------------------------------------

【原理】

Celetrix電轉(zhuǎn)技術(shù)即第三代電轉(zhuǎn)全新加壓電轉(zhuǎn)染技術(shù)，是通過(guò)對(duì)密封的電擊管進(jìn)行加壓電擊，產(chǎn)生的瞬間電流把一端的細(xì)胞膜打開(kāi)，幾十毫秒內(nèi)外源物質(zhì)（DNA，protein， etc.）進(jìn)入細(xì)胞膜內(nèi)，細(xì)胞膜再次瞬間關(guān)閉，最終使得外源物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。

【技術(shù)對(duì)比】

1) 電擊管：兩端少量氣泡被壓縮，接近100%都是均勻有效區(qū)，可能是最后一代電轉(zhuǎn)技術(shù)。
2) 電極杯：有三點(diǎn)缺陷：①液面翹角處相當(dāng)于電阻并聯(lián)，阻值變小，分到的電壓偏小，細(xì)胞不能電轉(zhuǎn)。  ②由于兩端總電壓相等，液面凹面下方分到的電壓增加導(dǎo)致此處細(xì)胞死亡。 ③下方液面電壓分配比較均勻，均勻有效區(qū)小。
3) 毛細(xì)管：有明顯的缺陷， ①區(qū)有效時(shí)，②區(qū)③區(qū)細(xì)胞無(wú)效；②區(qū)有效時(shí)，①區(qū)細(xì)胞死亡，③區(qū)無(wú)效。③區(qū)有效時(shí)，①區(qū)和②區(qū)細(xì)胞死亡。①②③區(qū)只能選一個(gè)最佳，不好兼顧。另外，毛細(xì)管沒(méi)有壓力，氣泡影響特別大，造成電弧、實(shí)驗(yàn)失敗等。

【服務(wù)領(lǐng)域】

輕松電轉(zhuǎn)所有細(xì)胞系（貼壁與懸浮細(xì)胞）與原代真核細(xì)胞：

【應(yīng)用領(lǐng)域】

1. 細(xì)胞免疫治療新時(shí)代

(1)PBMC使用普通GFP質(zhì)粒電轉(zhuǎn)結(jié)果與流式分析圖

普通GFP質(zhì)粒電轉(zhuǎn)24h后效率大于80%

(2)PBMC使用SB轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)表達(dá)CAR-T2A-GFP結(jié)果

PBMC電轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)座子14天后的CAR表達(dá)效率為65.9%，并且細(xì)胞狀態(tài)和未電轉(zhuǎn)的一樣穩(wěn)定快速聚集生長(zhǎng)

(3)7天擴(kuò)增的NK細(xì)胞電轉(zhuǎn)后第7天（總培養(yǎng)14天）CD56-PE染色分析

電轉(zhuǎn)GFP轉(zhuǎn)座子兩個(gè)質(zhì)粒7天后，細(xì)胞用CD56-PE染色分析；NK細(xì)胞比例大約有86%；其中GFP陽(yáng)性的有68%，比第四天稍有下降

2.基因編輯

電轉(zhuǎn)Cas9和gRNA(+)或者Cas9蛋白，通過(guò)T7E1核酸內(nèi)切酶檢測(cè)基因編輯效率，在APP, AAVS1, OCT4和PDCD1四個(gè)基因位點(diǎn)的編輯效率均超過(guò)50%，其中AAVSl基因位點(diǎn)編輯效率能達(dá)到70%

3.抗體生產(chǎn)

CHO細(xì)胞電轉(zhuǎn)6kb小質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)效率＞99%
普通質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)表達(dá)抗體
轉(zhuǎn)座子高效整合系統(tǒng)表達(dá)抗體

CHO細(xì)胞電轉(zhuǎn)11kb較大質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)效率＞80%
GFP, mCherry代替HC,LC
含有GS篩選標(biāo)記可做穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株

 
4.干細(xì)胞電轉(zhuǎn)
Human iPSC 高效電轉(zhuǎn)、保持未分化狀態(tài)，可進(jìn)行基因編輯
ACS-1030 transfection with GFP plasmid 72 hours（SBI, Coriell iPSC similar）

【電轉(zhuǎn)體系】
基礎(chǔ)款細(xì)胞電轉(zhuǎn)儀SP100：20ul、100ul兩個(gè)電轉(zhuǎn)體系；

升級(jí)款細(xì)胞電轉(zhuǎn)儀LE+：20ul,120ul,200ul三個(gè)電轉(zhuǎn)體系；

升級(jí)款細(xì)胞電轉(zhuǎn)儀EX+：可適配20ul、100ul、200ul、600ul、1ml電擊管;

大體積細(xì)胞電轉(zhuǎn)儀SLT：可適配200ul、1ml、5ml、10ml電擊管；

超高壓細(xì)菌、酵母電轉(zhuǎn)儀UHV：酵母電轉(zhuǎn)可適配20ul、100ul、200ul和1ml；細(xì)菌電轉(zhuǎn)可適配20ul，100ul，600ul；

細(xì)菌、酵母、細(xì)胞電轉(zhuǎn)一體機(jī)UHV-Plus：酵母電轉(zhuǎn)可適配20ul、100ul、200ul和1ml；細(xì)菌電轉(zhuǎn)可適配20ul，100ul，600ul；細(xì)胞電轉(zhuǎn)可適配20ul電擊管，細(xì)胞量0.5-3X10^6

【產(chǎn)品參數(shù)】